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Plataforma de testeo de endotoxinas bacterianas (BET) Sievers Eclipse

Tecnología innovadora que brinda automatización y cumplimiento

La innovadora plataforma Sievers Eclipse disminuye el tiempo de preparación del ensayo en hasta un 85% y reduce el uso del reactivo lisado de amebocitos de Limulus (LAL) en hasta un 90% a la vez que cumple con todos los requisitos de la farmacopea armonizada: USP 85, EP 2.6.14 y JP 4.01. Mediante una revolucionaria tecnología, la plataforma Eclipse disminuye significativamente los pasos para usar los tubos de ensayo, reduce la variabilidad de operador a operador y simplifica la preparación del ensayo. La plataforma Eclipse utiliza un manejo preciso de líquidos microfluídicos y endotoxina incrustada para automatizar los ensayos cinéticos cromogénicos. La producción de 21 muestras por placa se mantiene sin la complejidad de la robótica o el tiempo y la técnica que requiere un ensayo tradicional.

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Testeo de endotoxinas bacterianas consistente, consciente y que cumple con las normas

La plataforma Eclipse logra automatización y precisión en ensayos BET sin incumplir las normas, sin reacciones bioquímicas y sin tener impacto en el laboratorio. Usando estándares de endotoxinas incrustadas y controles de productos positivos (PPC) con solo <30 pasos para utilizar los tubos de ensayo, la microplaca Sievers Eclipse patentada ofrece automatización sin la complejidad ni los gastos de la robótica.

Características y beneficios

Características y beneficios de la plataforma Eclipse para laboratorio

  • Permite la preparación de ensayos de 21 muestras que cumplen con todas las normas en tan solo 9 minutos
  • Reduce el uso del reactivo lisado de amebocitos de Limulus (LAL) en hasta un 90%
  • Cumple con todos los requisitos de la farmacopea armonizada: USP 85, EP 2.6.14 and JP 4.01
  • Curva estándar de endotoxina incrustada y PPC
  • Proporciona segmentos para curvas estándar, muestras y PPC
  • Baja sensibilidad de hasta 0.005 EU/mL
  • Solución de software para empresas que cumple con 21 CFR Parte 11 y las pautas de integridad de datos
  • Disminuye la necesidad de una capacitación extensa para operadores
  • Reduce el riesgo de repetidas lesiones por estrés
  • Mejora la producción diaria de muestras
  • Uso comercial disponible, LAL con licencia de FDA
  • Controla la temperatura de las reacciones dentro de 37 +/- 1 °C usando un analizador de absorbancia

Especificaciones

Especificaciones

Detalles del sistema

Método BET Cinético cromogénico
Modo de detección Absorbancia
Rango 0.005-50 EU/mL
Precisión ≤ Tiempo de inicio de 15% CV
Exactitud 50-200% de la real
Tipo de muestra Acuosa, inyectada por tubo de ensayo
Calibración Hasta 12 meses
Tiempo de análisis Hasta 2 horas
Temperatura de la muestra 37 ± 1 °C
Temperatura ambiente 17- 30 °C
Capacidad Hasta 21 muestras en duplicado con controles de productos positivos
Control de temperatura 37 ± 0.5 °C
Fuente de luz Emisor LED
Detección de fallas fluídicas Emisor de 1450 nm
Precisión óptica ≤ Diferencia de 5% del valor esperado
Linealidad óptica Valor R ≥ 0.980
Filtro óptico de longitud de onda 405 nm
Intervalo de lectura 5 segundos

Especificaciones del analizador

Salidas Digital por USB
Pantalla OLED
Requisito de energía 100-240 voltios AC a 40/60 Hz
Fusibles

Fusible T 8 A 250 VAC, tamaño 5 x 20 mm SOLO Littlfuse 218008 o Cooper Bussmann S506-8-R.

Dimensiones Al.: 17.5 cm (6.9 in); An.: 35.1 cm (13.8 in); Prof.: 50.3 cm (19.8 in)
Peso 10 kg (22.1 lb)
Certificaciones de seguridad UL 61010-1:2012Ed.3+R:20Apr2016, CSA C22.2#61010-2-020, CSA C22.2#61010-1-12:2012Ed.3+U1;U2, IEC 61010-1:2010 Ed.3+C1;C2, UL 61010-2-010:2015Ed.3, IEC 61010-2-010:2003Ed.2, UL 61010-2-020:2016Ed.3, IEC 61010-2-020:2016Ed.3, CSA C22.2#61010-2-010:2015Ed.3

Ambiente

Humedad relativa máxima 85%, sin condensación
Altitud máxima 3,000 m (9.800 ft)
Grado de contaminación 2

Componentntes

Componentes de la plataforma Eclipse

  • Analizador: analizador de absorbancia con control de incubación consistente a 37 °C, tecnología centrífuga y transmisión segura de datos.
  • Microplaca: dispositivo de manejo preciso de líquidos que logra la automatización a través de una tecnología microfluídica innovadora con estándares de endotoxinas incrustadas y controles de productos positivos (PPC).
  • Software: solución para empresas muy recomendable que cumple con  21 CFR Parte 11 y las pautas de integridad de datos de ALCOA+.

La microplaca Eclipse, junto con el analizador y el software Eclipse, usan fuerza centrífuga y cámaras neumáticas para medir y distribuir uniformemente cantidades precisas de agua de reactivos LAL, muestras y LAL a través de 104 pozos ópticos Los pozos ópticos componen segmentos para curvas estándar, muestras y PPC. La reacción se controla a 37 +/-1 °C y se logra una vista de alta definición de cada pozo obteniendo una lectura de 405 nm cada cinco segundos.

Recursos

¿Qué son las endotoxinas bacterianas?

Las endotoxinas bacterianas se encuentran en la membrana externa de la pared celular de las bacterias gramnegativas. El efecto endotóxico de las bacterias gramnegativas se debe principalmente al lípido A, un componente de los lipopolisacáridos (LPS) que puede inducir respuestas pirógenas (que producen fiebre) potencialmente peligrosas e incluso fatales si se encuentran en el torrente sanguíneo y otros fluidos corporales en concentraciones superiores a ciertos niveles. Como algunos productos farmacéuticos y dispositivos médicos ingresan en el torrente sanguíneo, en esas industrias son obligatorias las pruebas de detección de endotoxinas. Por su fuerte toxicidad y su efecto en la seguridad de los pacientes, las endotoxinas son reguladas en todo el mundo por la FDA de EE.UU. y la farmacopea internacional en el caso de cualquier producto de las biociencias que vaya a estar en contacto con sangre humana y/o animal.

¿Por qué hay que hacer pruebas de detección de endotoxinas bacterianas?

En el sector farmacéutico y el de los equipos médicos, así como otras industrias de las ciencias biológicas, las pruebas de detección de endotoxinas son cruciales para el control de calidad y la seguridad del paciente. Las pruebas de detección de endotoxinas se realizan en sistemas de agua de uso farmacéutico, entre ellos el agua para inyección (WFI) usada como ingrediente, y productos terminados como fármacos, fármacos veterinarios y productos biológicos y para dispositivos médicos. Los productos médicos y farmacéuticos testeados incluyen los productos farmacéuticos para uso parenteral (administrados a través de inyección por vía intravenosa, subcutánea, intramuscular e intradérmica) y los dispositivos médicos que tienen contacto directo o indirecto con la sangre, el sistema cardiovascular, el sistema linfático o el líquido cefalorraquídeo. Las farmacopeas internacionales (USP <85>, EP 2.6.14 y JP 4.01) describen las normas para el testeo de endotoxinas bacterianas (BET, según su sigla en inglés) y los límites de endotoxinas. Las directrices de la FDA incluyen recomendaciones para fabricantes de productos biológicos, fármacos y equipos médicos basadas en los conceptos vigentes sobre las recomendaciones para los testeos y los criterios de aceptación cubiertos en los procedimientos farmacopeicos.

¿Cómo se realizan las pruebas de detección de endotoxinas?

Durante casi 40 años, la FDA de EE. UU. ha aceptado la prueba mediante lisado de amebocitos de Limulus (LAL) para la detección de endotoxinas en productos terminados. Este ensayo in vitro, que se usa en lugar de la prueba de pirógenos en conejos, permite detectar la presencia y la concentración de endotoxinas bacterianas. En las pruebas de LAL, el lisado de la sangre de cangrejos herradura (Limulus polyphemus) reacciona con las endotoxinas bacterianas y así confirma su presencia en una muestra. Existen tres métodos principales para los testeos con LAL: turbidimétrico, cromogénico y de gelificación. En el método de gelificación, se mezclan el LAL y la muestra, y el operador busca detectar la formación de gel o coágulos en el tubo de reacción. Los resultados se obtienen a partir de la interpretación subjetiva de la formación del coágulo, por lo cual el método de gelificación es una prueba cualitativa. En los métodos turbidimétrico y cromogénico, las muestras se mezclan con el reactivo LAL y se van midiendo el cambio de color y la turbidez en diferentes momentos. Los métodos cromogénico y turbidimétrico para los ensayos LAL son cuantitativos y muestran la cantidad de endotoxinas presente. Los resultados se calculan tomando como referencia una curva de calibración. Los límites de endotoxinas y las normas para realizar los BET se describen en la farmacopea internacional, USP <85>, EP 2.6.14 y JP 4.01. Un capítulo general nuevo de la Farmacopea Europea describe un método para BET en el que se usa el factor C recombinante (rFC) en vez del clásico método basado en LAL.

¿Qué cantidad de reactivo de lisado de amebocitos de Limulus (LAL) se usa con la plataforma para BET Sievers Eclipse?

Con apenas 1 mL del reactivo de LAL, en la plataforma Eclipse se pueden procesar 21 muestras. Al reducir hasta en un 90% el uso de lisado de cangrejo herradura (HSC, por su sigla en inglés), Eclipse disminuye la demanda de este valioso recurso natural y permite realizar ensayos de endotoxinas bacterianas (BET) que cumplen todas las normas sin perjudicar a la población global de HSC.

¿La plataforma para BET Sievers Eclipse cumple con todas las normas?

Sí. La plataforma Eclipse utiliza LAL disponible en el mercado, con licencia de la FDA, y cumple todos los requisitos de la farmacopea internacional armonizada: USP <85>, EP 2.6.14 y JP 4.01. Las pruebas de detección de endotoxinas con la plataforma Eclipse incluyen: curva de calibración con un mínimo de tres puntos por duplicado, con endotoxina estandarizada; muestras y controles de productos positivos (PPC) por duplicado; controles negativos por duplicado; certificación de lotes de lisados por triplicado a cargo de analistas; uso de LAL con licencia de la FDA. Además, cumple con 21 CFR Parte 11 y las pautas de integridad de datos.

Con Sievers Eclipse, ¿las curvas estándar se automatizan?

Sí. Habitualmente, para que las pruebas de endotoxinas cumplan con las normas el usuario final debe armar una curva de calibración de al menos tres puntos por duplicado a partir de un vial base de endotoxina estandarizada; además, deben hacérseles controles negativos por duplicado y se debe procesar cada muestra por duplicado con PPC, también por duplicado. Con la plataforma para BET Sievers Eclipse, estos pasos se automatizan de acuerdo con estándares de endotoxinas precargados, que alcanzan una curva de calibración de hasta cinco puntos, y PPC también configurados previamente. Por lo tanto, lo único que debe hacer el usuario final es cargar el agua para BET y las muestras en la placa, sin necesidad de preparar nada más. Como resultado, se puede preparar el ensayo en solo 9 minutos, mientras que con las otras plataformas generalmente se tarda más de 60.